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RNA PCR ARRAY服務(wù)
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RNA PCR ARRAY服務(wù)
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簡(jiǎn)介:
- RT2Profiler PCR芯片是研究一組特異性基因表達(dá)水平的理想方法�；赟YBR green 的實(shí)時(shí)定量PCR方法，同時(shí)將微列陣技術(shù)與特定生物學(xué)通路（specific biological pathways）的研究有機(jī)結(jié)合, 可以大大縮短發(fā)現(xiàn)診治各種疾病的生物學(xué)標(biāo)志物(biomarkers)的時(shí)間適用面廣，簡(jiǎn)單方便，使PCR芯片具有廣泛的應(yīng)用前景。由于每種芯片都是根據(jù)特別的信號(hào)通路或者特定的應(yīng)用范圍設(shè)計(jì)的，研究者可以用它來(lái)研究自己感興趣的一組基因，一個(gè)生物學(xué)通路或者某種疾病狀態(tài)。PCR芯片所研究的基因范圍相對(duì)集中，大大節(jié)省了在數(shù)據(jù)分析方面所花費(fèi)的時(shí)間，相對(duì)更簡(jiǎn)潔針對(duì)性更強(qiáng)的信息也有利于接下來(lái)的更深入更準(zhǔn)確的研究。因此，研究者使用PCR芯片，可以在更短的時(shí)間內(nèi)得到更豐富的信息。芯片包括預(yù)設(shè)計(jì)的通路特異性PCR芯片或者客戶訂制PCR芯片。PCR芯片具有與實(shí)時(shí)定量PCR相當(dāng)?shù)撵`敏度，特異性和重復(fù)性。PCR芯片的設(shè)計(jì)思路，使實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和實(shí)際完成實(shí)驗(yàn)的時(shí)間大大縮短，對(duì)結(jié)果的分析也更直接有效。使用PCR芯片，每張芯片使用的總RNA樣品量最少可低至25ng，最多則可達(dá)到5.0ug。PCR芯片的特異性保證擴(kuò)增產(chǎn)物的唯一性和基因特異性。因此，檢測(cè)得到的基因表達(dá)水平差異真實(shí)的反映了所要研究的基因的情況，是研究者開(kāi)展研究的得力工具。
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PCR芯片的設(shè)計(jì)和所包含的基因：
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96孔模式的每種RT2Profiler PCR芯片，含有基因特異性引物，可用于研究84個(gè)與某種信號(hào)通路或者疾病相關(guān)的基因。此外，芯片中還有設(shè)置了3個(gè)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的對(duì)照。
 圖1 PCR芯片示意圖
- A1-G12孔包含了同一信號(hào)通路或者疾病的84個(gè)相關(guān)基因的引物（gene 1- gene 84）。
- H1-H5孔包含了5個(gè)看家基因（HK1-HK5），用于芯片數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)化。
- H6為基因組DNA參照（GDC），其中固定的引物能特異性的檢測(cè)非轉(zhuǎn)錄的基因組DNA重復(fù)片段，從而檢測(cè)樣品中是否存在DNA污染。
- H7到H9是三個(gè)重復(fù)的孔，均為反轉(zhuǎn)錄參照（RTC），用于檢測(cè)RT反應(yīng)的效率。
- H10到H12是陽(yáng)性PCR參照（PPC），反映了PCR反應(yīng)的效率。這些孔中加入了人工合成的DNA序列和相應(yīng)的引物對(duì)。兩組重復(fù)的對(duì)照RTC和PPC也可以用于檢測(cè)芯片間和芯片內(nèi)的一致性。
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